Na Duhovske Zadušnice, pravoslavni vernici okupljaju se u crkvama gde se služi sveta liturgija i parastos, a sveštenici čitaju molitve za duše preminulih. Nakon bogosluženja, običaj nalaže da vernici izađu na groblja kako bi upalili sveće svojim dragim preminulim osobama, a sveštenici će tamo obavljati i pojedinačne parastose. Ukoliko neko nije u mogućnosti da obiđe grob, važno je znati da sveću za pokoj duše može zapaliti i u crkvi, čime se iskazuje jednako poštovanje i sećanje.
Važno je istaći da, iako mnogi ljudi praktikuju odnošenje hrane na groblje, sveštenici preporučuju da se umesto toga fokusira na molitvu i poštovanje pravih hrišćanskih vrednosti. Suština Zadušnica leži u duhovnom sećanju i molitvenom opelu za duše preminulih, a ne u materijalnim prinosima.
Podsećamo, Zadušnice se obeležavaju četiri puta godišnje, uvek subotom. Pored Duhovskih, imamo i Zimske Zadušnice koje se obeležavaju pred Mesne poklade, Miholjske Zadušnice u subotu pred Miholjdan, i Mitrovske Zadušnice u subotu pred Mitrovdan. Zanimljivost je da su Miholjske Zadušnice jedine kada vernici tradicionalno ne posećuju grobove.